新冠疫苗保護(hù)性能評(píng)估
為了應(yīng)對(duì)新冠疫情威脅,目前已經(jīng)有很多國(guó)家開(kāi)始了疫苗接種工作,但接種新冠疫苗后,產(chǎn)生的保護(hù)效果并不確定,評(píng)估新冠疫苗有效性的重要指標(biāo)之一就是接種者體內(nèi)中和抗體的含量。針對(duì)大規(guī)模疫苗接種后的人群,使用簡(jiǎn)單、快速的膠體金免疫層析法,可快速評(píng)估每個(gè)接種者體內(nèi)的抗RBD抗體及中和抗體的水平。
采用膠體金免疫層析技術(shù),通過(guò)雙抗原夾心法測(cè)試RBD結(jié)合抗體:取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區(qū),血清會(huì)在毛細(xì)作用下向前層析,結(jié)合墊上的膠體金會(huì)溶解,然后和血清一起向前移動(dòng)。血清到達(dá)檢測(cè)區(qū)后,膠體金標(biāo)記的S-RBD、血清中的抗體與檢測(cè)線(xiàn)上包被的S-RBD形成復(fù)合物,表現(xiàn)為檢測(cè)線(xiàn)顯色,血清中的抗體含量與檢測(cè)線(xiàn)顯色強(qiáng)度成正相關(guān)。反應(yīng)結(jié)束后,直接肉眼觀察顯色情況或采用膠體金檢測(cè)儀進(jìn)行測(cè)試。通過(guò)檢測(cè)線(xiàn)和質(zhì)控線(xiàn)上膠體金顯色強(qiáng)弱,可判斷RBD抗體的含量。該方法可檢測(cè)血清、血漿及其他分泌物中含有可與RBD相互作用的任何抗體,并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。
膠體金免疫層析檢測(cè)RBD結(jié)合抗體
應(yīng)用場(chǎng)景
血清中RBD抗體篩查、早期患者血清學(xué)診斷及疫苗臨床效果評(píng)價(jià)—抗RBD總抗體檢測(cè)。
測(cè)試結(jié)果
標(biāo)記: 膠體金標(biāo)記S-RBD (bs-46003P)和膠體金標(biāo)記兔IgG (bs-0295P)包被: C線(xiàn)為羊抗兔IgG (bs-0295G),T線(xiàn)為S-RBD (bs-46003P/bs-46005P)
備注:“+++”表示反應(yīng)很強(qiáng);“++”表示反應(yīng)較強(qiáng);“+”表示反應(yīng)較弱;“±”反應(yīng)很弱;“-”表示無(wú)反應(yīng)。
采用膠體金免疫層析法的競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)試RBD中和抗體:取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區(qū),血清會(huì)在毛細(xì)作用下向前層析,結(jié)合墊上的膠體金會(huì)溶解,然后和血清一起向前移動(dòng)。血清到達(dá)檢測(cè)區(qū)后,膠體金標(biāo)記的S-RBD與檢測(cè)線(xiàn)上包被的ACE2結(jié)合,并被固定在檢測(cè)線(xiàn)上,表現(xiàn)為檢測(cè)線(xiàn)顯色,而血清中的中和抗體會(huì)與檢測(cè)線(xiàn)上的ACE2競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合S-RBD,從而導(dǎo)致固定在檢測(cè)線(xiàn)上的S-RBD減少,檢測(cè)線(xiàn)顯色下降。反應(yīng)結(jié)束后,直接肉眼觀察顯色情況或采用膠體金檢測(cè)儀進(jìn)行測(cè)試。通過(guò)檢測(cè)線(xiàn)和質(zhì)控線(xiàn)上膠體金顯色強(qiáng)弱,可判斷中和抗體抑制效果。該方法可檢測(cè)血清、血漿中可阻斷RBD-ACE2相互作用的任何抗體,并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。
膠體金免疫層析檢測(cè)RBD中和抗體
應(yīng)用場(chǎng)景
疫苗臨床效果評(píng)價(jià)、康復(fù)者血清中保護(hù)性抗體水平檢測(cè)—模擬病毒侵襲細(xì)胞過(guò)程,通過(guò)阻斷RBD與ACE2的結(jié)合間接評(píng)價(jià)機(jī)體內(nèi)抗RBD中和性抗體的水平。
測(cè)試結(jié)果
標(biāo)記: 膠體金標(biāo)記RBD (bs-46003P)和膠體金標(biāo)記兔IgG (bs-0295P)包被: C線(xiàn)為羊抗兔IgG (bs-0295G),T線(xiàn)為Human ACE2 (bs-46001P/bs-46002P)
由此可見(jiàn),陰性血清無(wú)中和活性,而陽(yáng)性血清中含有中和性抗體,血清稀釋倍數(shù)在1:200時(shí)可完全阻斷RBD與ACE2的結(jié)合。
Bioss提供新冠抗體及中和性抗體檢測(cè)原料
Cat# |
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Recombinant Human ACE2 (His-Avi tag, HEK293) |
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Recombinant Human ACE2 (Fc-Avi tag,HEK293) |
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Recombinant SARS-CoV-2 Spike RBD (His-Avi,HEK293) |
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Recombinant SARS-CoV-2 Spike RBD (Fc-Avi,HEK293) |
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