你有沒有經(jīng)歷過這樣的崩潰時刻？辛辛苦苦做的WB條帶突然消失，免疫熒光染色結(jié)果慘不忍睹，甚至復現(xiàn)師兄的實驗卻得出南轅北轍的結(jié)果？這不是你的技術(shù)有問題，而是科研抗體的“通病”——特異性不足、重現(xiàn)性差，正在悄悄毀掉你的研究成果~
行業(yè)痛點：抗體市場的“隱形殺手”
在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，抗體是實驗的“剛需工具”，卻也是公認的“不確定因素”。據(jù)Baker M.(2016)《Nature》(doi:10.1038/533452a)統(tǒng)計，超70%的科研人員無法重復他人實驗結(jié)果，過半人甚至無法復現(xiàn)自己的數(shù)據(jù)。這背后的罪魁禍首，正是抗體的兩大硬傷：特異性不足及批次差異大。 許多實驗室被迫“賭運氣”，用大量時間和經(jīng)費試錯，結(jié)果往往是“竹籃打水一場空”。
KO驗證：抗體特異性的“照妖鏡”
目前接受度最廣且最受信任的抗體特異性驗證方法是基因敲除(Knock-out, KO)驗證。KO驗證是抗體特異性驗證的金標準。在一個敲除細胞株中，由于表達特定靶標蛋白的基因被敲除，蛋白靶標并不存在。如果抗體是特異的，在敲除細胞株中就不會檢測到結(jié)果，但在對照細胞株（或野生型細胞株）中就會檢測到特定的信號。與野生型相比，KO中的信號丟失是抗體特異性的最可靠證據(jù)，也說明抗體專一得“死心塌地”。
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科研人的“避坑指南”
抗體實驗翻車并不可怕，可怕的是在錯誤的道路上越走越遠。選擇經(jīng)過KO/KD驗證的高特異性抗體，就像給實驗上了“雙保險”——既節(jié)省時間成本，又提升成果可信度?？蒲袩o捷徑，但好的工具能讓努力事半功倍。告別“玄學實驗”，從選擇可靠的抗體開始！
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EGFR Recombinant Rabbit mAb
ICC｜A549(left) cell and EGFR knockout A549(right) cell
細胞系貨號：K004-4-4P
EGFR Rabbit pAb
WB｜A549 cell
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